平電泳儀是一種常用于生物學(xué)、化學(xué)和分子生物學(xué)實驗中的設(shè)備,主要用于DNA、RNA或蛋白質(zhì)等分子樣品的電泳分離。為了確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和儀器的穩(wěn)定性,定期對水平電泳儀進行效驗(驗證)是非常必要的。以下是水平電泳儀的效驗規(guī)程:
水平電泳儀效驗規(guī)程
1.外觀檢查
檢查儀器外觀:確保電泳儀的外殼、蓋子、導(dǎo)電板、槽體和電源連接部分沒有明顯的損壞或腐蝕。
電纜與連接:檢查電源線和連接線是否完好無損,確保沒有磨損、裸露或短路的風(fēng)險。
電泳槽:檢查電泳槽是否清潔,無污染物或固體雜質(zhì)。
2.電氣系統(tǒng)檢查
電源檢查:確認(rèn)電泳儀的電源是否正常工作,電壓和電流輸出是否符合規(guī)格要求??梢允褂萌f用表測量輸出電壓,確保其穩(wěn)定性和精度。
電流控制與電壓控制:確保電壓與電流顯示正常,調(diào)節(jié)電壓和電流后觀察其反應(yīng)是否平穩(wěn),是否能達到設(shè)定值并保持穩(wěn)定。
接地保護:檢查儀器是否接地良好,確保實驗人員的安全。
3.電泳槽水位與溶液檢查
水位檢查:電泳槽中的緩沖液水位需要保證在合適的范圍內(nèi),通常需要覆蓋電泳板上面1–2cm的距離。
緩沖液檢查:確保緩沖液配制正確,pH值和離子強度符合實驗要求,避免因緩沖液問題影響電泳結(jié)果。
4.電泳運行驗證
空載運行:在不加入樣品的情況下運行電泳儀,觀察其是否能正常啟動,電壓和電流是否穩(wěn)定。
溫度控制檢查:某些電泳儀會配有溫控系統(tǒng),用于控制電泳過程中的溫度,確保溫度穩(wěn)定,避免因溫度過高導(dǎo)致電泳結(jié)果失真。
5.電泳實驗效驗
標(biāo)準(zhǔn)樣品運行:選擇標(biāo)準(zhǔn)分子量標(biāo)記物(如DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)品)進行電泳實驗。通過觀察標(biāo)準(zhǔn)樣品的電泳條帶形態(tài)來評估電泳儀的分離效果。
分離效果分析:在一定電壓下運行樣品,觀察條帶是否清晰,是否有拖尾或條帶模糊現(xiàn)象,檢查是否符合預(yù)期的分離結(jié)果。
分辨率與靈敏度:評估電泳儀在正常運行條件下的分辨率與靈敏度,確保其能夠滿足實驗需求。
6.儀器校準(zhǔn)
電壓與電流校準(zhǔn):使用已知的電阻或標(biāo)準(zhǔn)負(fù)載測試電泳儀的電壓輸出是否符合設(shè)定值,電流輸出是否穩(wěn)定。
電泳性能驗證:根據(jù)分子量標(biāo)準(zhǔn)品的電泳遷移情況,判斷電泳儀的性能是否穩(wěn)定,是否出現(xiàn)電泳偏差。
電泳槽對稱性校準(zhǔn):使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)測試,觀察電泳槽兩側(cè)的電場是否均勻,條帶是否對稱。
7.記錄與報告
效驗記錄:每次效驗后,詳細(xì)記錄儀器的檢查、校準(zhǔn)與測試結(jié)果,包括電壓、電流、溫度、分離效果等數(shù)據(jù)。
故障排查:若電泳結(jié)果異常,需要進行故障排查,檢查電源、儀器電路和實驗條件,確保問題得到解決。
注意事項:
定期效驗:建議定期進行效驗檢查,通??梢愿鶕?jù)使用頻率和實驗要求,每季度或半年進行一次效驗。
環(huán)境因素:效驗時,應(yīng)保證環(huán)境條件符合實驗要求,避免濕度過高或溫度過低影響實驗結(jié)果。
操作規(guī)范:使用電泳儀時,應(yīng)遵循操作手冊,避免因操作不當(dāng)導(dǎo)致儀器故障或?qū)嶒灁?shù)據(jù)不準(zhǔn)確。
電泳儀清潔:保持電泳槽和電泳板的清潔,避免污垢和電解質(zhì)沉積影響實驗結(jié)果。
總結(jié):
水平電泳儀的效驗規(guī)程主要包括外觀檢查、電氣系統(tǒng)檢查、電泳性能驗證、校準(zhǔn)和標(biāo)準(zhǔn)樣品運行等步驟。通過定期的效驗,可以確保電泳儀的運行狀態(tài)良好,保障實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。